Endotoxin challenge vizsgálatok

Az USP 24 törvény 1211-es fejezete definiálja a pirogénmentesítési ciklus követelményét. A törvény alapján az a pirogénmentesítési eljárás elfogadható, ahol az eredeti endotoxin koncentráció értéke 3 nagyságrenddel csökken.

Az endotoxin mentesítés USP követelmények szerinti megfelelését endotoxin challenge vizsgálatokkal igazolják. A vizsgálat elvégzéséhez ismert mennyiségű (>1000 EU/cső) endotoxint tartalmazó hőálló csöveket használnak (ECVs- Endotoxin Challenge Vials). Az ECV-ket, a kemence validálási folyamata során meghatározott hidegpontokon, a rakomány között helyezik el és a szintén előre meghatározott idő/hőmérséklet profil alapján lefuttatják a pirogénmentesítési ciklust. A pirogénmentesítési program hatékonyságának vizsgálatára megmérik a challenge minták endotoxin tartalmát. A vizsgálathoz a pirogénmentesített és a kontroll (endotoxinnal szennyezett) ECV-ket LAL-vízzel rekonstituálják és kevertetés után megmérik az endotoxin tartalmukat. A kontroll és challenge minták eredményeit az USP követelményei szerint összehasonlítják. Amennyiben a pirogénmentesítési eljárás megfelelő hatékonyságú, a kontroll és challenge minták endotoxin tartalma között három nagyságrendű különbséget tapasztalnak.

Azt a kemencét, amelyet pirogénmentesítére használnak, validálni kell.

A validálási eljárás három fő részből áll:

1. A hőmérséklet profil meghatározása üres és tele kemence esetén a készülék hidegpontjainak, illetve a rakományon belüli hőmérséklet eloszlásának megállapítására.
2. Az idő/hőmérséklet profil megválasztása a hatékony pirogénmentesítési időtartam és hőmérséklet definiálására.
3. Az endotoxin challenge vizsgálat a pirogénmentesítés hatékonyságának bizonyítására.